GST融合蛋白不能有效洗脱，是什么原因导致的？

a. 洗脱时间不足； b. 增大Elution Buffer的洗脱体积； c. 加大Elution Buffer中还原型谷胱甘肽的浓度。谷胱甘肽的推荐浓度是10 mM，若此浓度洗脱效果不是很理想可以尝试50 mM Tris- HCl, 20–40 mM reduced glutathione, pH 8.0 的Elution Buffer； d. 增大Elution Buffer的pH值。Elution Buffer的pH值调至pH 8–9可以提高洗脱效率而不需要增加glutathione的浓度； e. 增加Elution Buffer的离子强度。加入0.1–0.2 M NaCl能提高洗脱效率； f. 改用新鲜配置的Elution Buffer； g. Elution Buffer中加入非离子型变性剂。非特异性的疏水作用可能会阻碍GST融合蛋白从磁珠上增溶和洗脱。加入0.1% Triton X-100 or 2% 和N-octylglucoside可以显著增加洗脱效率。